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F-BL21(DE3) 感受態(tài)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程

發(fā)表時間:2022-06-15
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
胎兒表皮角化細胞完全培養(yǎng)基
新生兒表皮角化細胞完全培養(yǎng)基
成人表皮角化細胞完全培養(yǎng)基
胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基
成人真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基
人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基
人內(nèi)臟脂肪細胞完全培養(yǎng)基
人軟骨細胞完全培養(yǎng)基
人表皮黑色素細胞完全培養(yǎng)基
人破骨細胞完全培養(yǎng)基
人皮膚肥大細胞完全培養(yǎng)基
人成骨細胞完全培養(yǎng)基
人脂肪細胞完全培養(yǎng)基
人表皮角質(zhì)形成細胞完全培養(yǎng)基
人前脂肪細胞完全培養(yǎng)基
人腦動脈血管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人腦動脈血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
人腦靜脈血管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人腦靜脈血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
人腦膜細胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)元細胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基


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