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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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Tuner(DE3) 感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63286
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63286
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口
規格參數:

產品名稱:Tuner(DE3) 感受態細胞
規格 :100ul*10 100ul*50
分類:表達感受態細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

長春質堿-d3質量規格:美國進口Catharanthine-d3  大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T  HumanHyaluronicacid,HAELISA試劑盒人透明質酸(HA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

阿苯達唑砜質量規格:美國進口Albendazole Sulfone  EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)試劑盒 Human EBEA IgG ELISA kit  Humanmalondialchehyche,MDAELISAKit人二(MDA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide  英文名稱MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C規格:96T/48T  大鼠內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit

培哚普利酰基-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Perindopril Acyl-β-D-glucuronide  冰凍切片色素(MELANIN)染色試劑盒50  人阿米巴(Amebiasis)ELISA檢測試劑盒HumanAmebiasisELISAKit 96T/48T

載玻片細胞HISTONEH3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  480-18-2花旗松素說明書  Taxifolin

Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA試劑盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒規格:96T/48T  6882-68-4槐定堿品牌  Sophoridine

小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ2 ELISA Kit  145572-44-7槐果堿規格  Sophocarpine

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA檢測試劑盒MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit 96T/48T  152-95-4槐角苷  Sophoricoside

人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗體試劑盒 Human ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit  84605-18-5環黃芪醇說明書  Cycloastragenol

58479-68-8桔梗皂苷D規格  Platycodin D   豬胰素樣肽2(GLP2)試劑盒 Pig glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA kit

5843-65-2去甲烏藥堿品牌  Higenamine  豬胰素樣肽1(GLP1)試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

58316-41-9柴胡皂苷B2說明書  Saikosaponin B2   豬胰素(GC)試劑盒 Pig Glucagon,GC ELISA Kit

Tuner(DE3) 感受態細胞578-86-9甘草素規格  Liquiritigenin   豬胰淀粉酶α2(PAMY α2)試劑盒 Pig Pancreatic Amylase α2,PAMY α2 ELISA Kit

57-87-4甾醇規格  Ergosterol  豬原(PI)試劑盒 Pig Proinsulin,PI ELISA Kit

聯系方式
手機:13564080845
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