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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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枯草芽孢桿菌PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P64630
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-09
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P64630
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

枯草芽孢桿菌PCR試劑盒

50

BK-P64630

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水瘤細胞,S-180細胞 SVEC4-10細胞,小鼠結(jié)上皮樣細胞青霉素(>95%(HPLC),BC)Penitrem A from Penicillium palitans質(zhì)量規(guī)格:>95%(HPLC),BC

永生化表皮細胞;HaCaTβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%BR)Pentaacetyl-β-D-galactopyranose質(zhì)量規(guī)格:>98%BR

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 細胞裂解液 (陽性對照) 造沸石Permutit質(zhì)量規(guī)格:Tech Grade

猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1酚肽二1酸四鈉(>96%,BC)Phenolphthalein diphosphate tetra salt質(zhì)量規(guī)格:>96%,BC

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 吩噻嗪(>98%,BR)Phenothiazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
肝內(nèi)膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)4--1-萘酚(4C1N)4-Chloro-1-naphthol (4-CN)質(zhì)量規(guī)格:0.99

FCGR2A Others Human  CD32a / FCGR2A 細胞裂解液 (陽性對照) 親和素;卵白素來源于雞蛋白Avidin from egg white質(zhì)量規(guī)格:10-15 units/mg protein,進分

AtT20 小鼠細胞2,2',4,4'-四羥基二苯甲酮(>95.0%(T))2,2',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)

大鼠肺細胞;WL12,4,4'-三羥基二苯甲酮(>98.0%(HPLC)(T))2,4,4'-Trihydroxybenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)

MDA-MB-231, 癌細胞2,3',4,4'-四羥基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T))2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)(T)
主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA噴托維林Carbetapentane質(zhì)量規(guī)格:美國進口

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) 卡洛芬乙酯 (卡洛芬雜質(zhì))Carprofen Ethyl Ester (Carprofen Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國進口

皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋卡洛芬-d3rac Carprofen-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口

C2C12細胞,鼠肌原細胞 H08910(細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1長春質(zhì)堿-d3Catharanthine-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口

EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)阿苯達唑砜Albendazole Sulfone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
低分化;SK-LU-1 大鼠腦內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧肌酐-5'-1酸鈉(>98%,BR)2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate  salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

MMQ 小鼠細胞鄰乙氧基苯(>98%,BR)2-Ethoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

TIMP2 Others Human  TIMP2 / TIMP-2 細胞裂解液 (陽性對照) 2-硝基芴(>99.0%(HPLC))2-Nitrofluorene質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)

色素細胞生長添加物(不含TPA)MelGS-29,9'-螺二[9H-](>98.0%(HPLC))9,9'-Spirobi[9H-fluorene]質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

SCN2B Others Human  SCN2B 細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))2-Aminoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
枯草芽孢桿菌PCR試劑盒主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

聯(lián)系方式
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