![]() |
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4202 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬圓環病毒2型PCR檢測試劑盒說明書 | Porcine Circovirus 2 (PCV2)2PCR | BKP4202 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優勢:
1. 特異性:豬圓環病毒2型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Flurbiprofen 中文名:氟比洛芬 分子式:C15H13FO2 血0濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
2-Fluoroadenosine 中文名: 分子式:C10H12FN5O4 血濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名: 分子式:C19H14F2O6 血清總鐵結合能力測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO 血漿游離基因組DNA提取試劑盒 Plasma free genomic DNA Exaction Kit
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 中文名: 分子式:C19H14FNO M13噬菌體單鏈基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA
環0酸腺苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規格: 48T/96T 英文縮寫: cAMP Withaphysalin E 118985-24-3 中文名: 分子式:C28H34O7
環0酸鳥苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規格: 48T/96T 英文縮寫: cGMP vibo-Quercitol 488-76-6 中文名: 分子式:C6H12O5
壞死因子相關凋亡誘導配體受體1 英文名稱: tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 規格: 48T/96T 英文縮寫: AIL R1 Perforatumone 827319-50-6 中文名: 分子式:C35H52O5
壞死因子相關凋亡誘導配體受體 3(AIL R3) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Arbidol 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S
壞死因子相關凋亡誘導配體受體 1(AIL R1) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Arbidol 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S 度:98.0%
豬圓環病毒2型PCR檢測試劑盒說明書TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸二異癸酯質量規格:Diisodecyl Adipate
小鼠皮質神經元MN-c壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))質量規格:>75.0%(GC)Bis(2-ethylhexyl) Azelate
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸二異丙酯(>99.0%(GC))質量規格:>99.0%(GC)Diisopropyl Adipate
大鼠胰腺上皮細胞完全培養基 100mL己二酸二丁酯(>99.0%(GC))質量規格:>99.0%(GC)Dibutyl Adipate
BALL-1人B細胞急性細胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide
PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Anilinexy7nochloride阿尼林鹽0.25毫升CP
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4本加醋芐酯 Bqnzyl Bqnzoctq;Bqnzyl bqnzqnq ccrboxylctq;Bqnzyl phqnyl forMctq 10-21-4
T-47D細胞,管癌細胞 人細胞,EC871214細胞 大鼠細胞;UMR-106葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Coarse 9048-71-9 100G 分離試劑
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B11,4-二乙磺酸倍半鈉鹽,英文名或英文縮寫:PIPES sesquiwo7ium salt,級別:AR,規格:100克
CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人細胞裂解液 (陽性對照) MaltExtractAgar 500g原裝 BD 211220/Oxoid
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。