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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3981 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒直銷 | Melissococcus plutoniusPCR | BKP3981 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人肺大平滑肌細胞完全培養基 100mLURIDINE尿苷超級50G58-96-8RT
A375細胞,人惡性色素瘤細胞 糞腸球菌 人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]同;9,10-二輕-9-氧 cnthronq;9(10H)-cnthrccqnonq;Ccrbothronq;cnthrcnonq 90-44-8
ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標簽)OTAC硬脂基基錄化5克色譜用,36~50目
KLE(人細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細胞裂解液 (陽性對照) D-纈酸5克RT,避光
EB病毒轉化的絨猴細胞;B95-8(支鏈淀粉)
HBE(人上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細胞培養基CM去噻唑基甲基 利托那韋Desthiazolylmethyl Ritonavir質量規格:美國進口
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-去甲基羅格列酮-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4質量規格:美國進口
RPRD1B Others Human 人 RPRD1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅格列酮(鉀鹽)Rosiglitazone (potassium salt)質量規格:美國進口
小鼠腹水瘤細胞;S-180羅格列酮鹽酸鹽rosiglitazone hydrochloride質量規格:美國進口
HPAEC細胞,人肺動脈內皮細胞 猴腎細胞系,BSC-1細胞 CL-0082F9(小鼠)5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮5-Hydroxy Rosiglitazone質量規格:美國進口
蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒直銷人口腔角質細胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經干細胞 Rattus9-(2-羥丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine質量規格:美國進口
猴腎細胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羥丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine質量規格:美國進口
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-1酸甘油酸激酶3-Phosphoglyceric Phosphokinase質量規格:1000u/mg,Sigma分裝
HPB-ALL(懸浮) T細胞1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP質量規格:90.0%,Sigma
769-P人腎細胞腺癌細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸性蛋白酶;蛋白酶來自佐氏曲霉Acidic Protease from Aspergillus 質量規格:BR,50u/mg
人脂肪微內皮細胞HAMEC抗壞血酸;維生素C質量規格:AR;>99%Ascorbic acid;vitamin C
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質量規格:含量測定Ascorbic acid;vitamin C
非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質量規格:AROctadecanamine
NCI-H157細胞,人非小細胞 小鼠細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養基100mL山梨酸質量規格:AR,99%Sorbic acid
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質量規格:HPLC≥98%,標準品DL-Menthol