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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3954 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
淋巴細胞性脈絡叢病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Lymphocytic Choriomeningitis Virus(LCMV)RTPCR | BKP3954 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
肺平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%魚明膠阻斷試劑蛋白組學級琥珀色至淺棕色液體COLDsigma
SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細胞裂解液 (陽性對照) β-葡萄糖苷酶 杏仁 (+4℃) BqTc-GLUCOSIDcSq 9001--3
人細胞;PC-3 [PC3]吉姆薩染料 Giemsa stain (for use as a blood stain) 51811-82-6 1G 染色劑
293細胞,人胚腎細胞 小鼠皮下結締組織細胞,A9細胞 CL-0242Vero(非洲綠猴腎細胞)5×106cells/瓶×2甜醇,英文名或英文縮寫:Dulcitol,級別:高,98%,規格:500毫克
YAC-1(小鼠瘤細胞) 5×106cells/瓶×2L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 國產
HUVE-12/CRL2480細胞,人臍內皮細胞 長臂猿瘤,MLA-144細胞 人真皮內皮細胞總RNAHDLEC NA鹽酸頭孢他美酯Cefetamet pivoxil hydrochloride質量規格:≥653μg/mg,BR
QSG-7701(人正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸頭孢他美酯(標準品)Cefetamet pivoxil hydrochloride質量規格:效價測定
EL4(小鼠瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(人色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎細胞;104C1L-生物喋呤L-Biopterin質量規格:>98%,BR
雜交瘤(B類);C3110D2E11渥曼青霉素Wortmannin質量規格:>98%,美國進口,PI3K/AKT通路的抑制劑
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 溴化新斯的明Neostigmine bromide質量規格:>98%
淋巴細胞性脈絡叢病毒PCR檢測試劑盒說明書HCT-8/VCR細胞,耐長春新堿細胞系 人色素瘤細胞,HME6細胞 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB杯莧甾酮(標準品)Cyasterone質量規格:HPLC≥98%,標準品
H4(人) 5×106cells/瓶×2四氫小檗堿(標準品)Tetrahydroberberine,THB質量規格:HPLC≥98%,標準品
CD274 Others Human 人 PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) 通關藤苷I(標準品)Tenacissoside I質量規格:HPLC≥98%,標準品
人肝臟星形細胞總RNAHHSteC NA通關藤苷G(標準品)Tenacissoside G質量規格:HPLC≥98%,標準品
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡丙素(標準品)Praeruptorin C質量規格:HPLC≥98%,標準品
人上皮樣細胞;BEAS-2B 人卵巢上皮細胞完全培養基 100mL乳白蛋白,英文名或英文縮寫:α-Lactalbumin,級別:BR,50u/mg,規格:1克
人神經束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg1,1,2-三錄烷 1,1,2-Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;β-Trichloroqthcnq 79-00-2
ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 麥芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020-36-6
兔源細胞甲基本基酮,英文名或英文縮寫:Acetopxenone,級別:色標,99%,規格:100克
AsPC-1細胞,轉移胰腺腺癌細胞 CoC1細胞耐藥亞株,CoC1/DDP細胞 人非小細胞細胞;NCI-H232133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride
特點優勢:
1. 特異性:淋巴細胞性脈絡叢病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。