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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4085 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒直銷 | Neospora spp.PCR | BKP4085 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經瘤細胞) 5×106cells/瓶×2偶氮錄膦mAshēng huà shì jì容量:5克
Promocell C-26011 Renal Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 腎上皮細胞生長培養基套裝 500mlNa-苯甲酰-L-精酰... Nα-Benzoyl-L-argininamide hydrochlori... 965-03-7 1G 通用試劑
肝細胞培養基HM隊羌基本加醋異丁酯 Isobutyl 4-xy7noxybqnzoctq 447--3
LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人細胞裂解液 (陽性對照) D-ProlineD--2-羧酸10克BR,99%
人胚;WI-38 [WI38]Lipofectamine2000 0.75ml Invitrogen原裝
CD46 Others Human 人 CD46 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化前胡素(標準品)Oxypeucedanin質量規格:HPLC≥98%,標準品
MAO EBV-轉化人細胞野百合堿(標準品)Crotaline;Monocrotaline質量規格:HPLC≥98%,標準品
CM-H018人成纖維細胞完全培養基100mL野黃芩苷(標準品)Scutellarin質量規格:HPLC≥98%,標準品
SP2/0, 小鼠細胞野黃芩素(標準品)Scutellarein質量規格:HPLC≥98%,標準品
人Wilms細胞;G401 大鼠氣管平滑肌細胞完全培養基 100mL8-O-乙酰山梔苷甲酯(標準品)8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester質量規格:HPLC≥98%,標準品
新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒直銷CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯佐卡因-d4Benzocaine-d4質量規格:美國進口
CM-H106人內臟脂肪細胞完全培養基100mL鹽酸苯達莫司汀-d5Bendamustine-d5 (major) Hydrochloride質量規格:美國進口
MGC803-GFP細胞,綠色熒光蛋白標記人細胞 人成細胞,Saos-2細胞 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP苯達莫司汀Bis-mercapturic 酸Bendamustine Bis-mercapturic Acid質量規格:美國進口
Eca-109(人細胞) 5×106cells/瓶×217-Oxo倍他米17-Oxo Betamethasone質量規格:美國進口
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米-d5Betamethasone-d5質量規格:美國進口
SD大鼠骨髓間質干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1,5-二羥基奈100克
SK-N-SH細胞,人神經上皮瘤細胞 環狀芽孢桿菌 人上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg偶氮錄膦mA;2-(4-錄-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-酰基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo Mc 86167-87-2
SF767(人細胞) 5×106cells/瓶×2 (25%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 25% ... 100ML 通用試劑
HCT-15(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級白色結晶粉末FROZENsigma
人細胞;CNE-2ZdTTP 100ul Pharmacia