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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4075 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應 | Neisseria meningitidisPCR | BKP4075 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人正常細胞;Hs 578BstAVIDIN,CHICKENEGGWHITE親合素試劑級白色凍干粉FROZENsigma
PVRL1 Others Human 人 PVRL1 / HVEC / CD111 / Nectin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 四丁基氫銨 Tetrabutylammonium hydrogensulfate,97% 32503-27-8 25G 通用試劑
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)灰皇每速 Grisqofulvin;cMudcnq;Curling fcctor;Fulcin;Fulvicin;Grifulvin;Griscct 2016/7/8
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) NAOH-SDSLYSISSOLUTION裂解液,NaOH/SDS超級透明液體RT不sigma
人急性單核細胞細胞;THP-1二氧化Lead dioxide
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢磺啶鈉Cefsulodine 質量規格:Cefsulodine> 864μg /mg,BR
CM-R106大鼠神經膠質細胞完全培養基100mL鄰苯二o-Phthalaldehyde質量規格:>97%,BR
KYSR450細胞,人細胞 人XG惡性細胞,SF-295細胞 豬內皮細胞;ZYM-SVEC01醋酸美倫孕酮; 甲1雌醇乙酸酯Melengestrol acetate質量規格:USP
CHL(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2膽酯酶;膽甾醇酯酶Cholesterol esterase 質量規格:>300 U/mg,進分
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125SP600125質量規格:HPLC>98%,進分,JNK抑制劑
奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽H-Leu-OEt·HCl質量規格:>98%
615小鼠株;Ca763L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-Phe-OEt.HCl質量規格:>98%,BR
MC3T3-E1 Subclone 14細胞,小鼠原成骨細胞 人細胞系,LM-6細胞 CL-0112HMy2.CIR(人B母細胞)5×106cells/瓶×2甘氨酸乙酯鹽酸鹽Glycine ethyl ester hydrochloride質量規格:>98%,BR
中國倉鼠肺細胞;CHLL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽L-Mine ethyl ester hydrochloride質量規格:>98%(T),BR
TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 質量規格:0.98
小鼠漿細胞瘤;MPC-11HRP標記羊抗人纖維蛋白shēng huà shì jì容量:RT2000只/箱
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細胞裂解液 (陽性對照) 鱗晴基P4-t-Bu四拂硼醋鹽 ≥97.0% (NMR) 1-TqRT-BUTYL-4,4,4-TRIS(DIMqTHYLcMINO)-2,2-BIS[TRIS(DIMqTHYLcMINO) PHOSPHORcNYLIDq-NcMINO]-2LcMBDc5,4LcMBDc5-CcTqNcDI(PHOSPHcZqNIUM) BF4 181471-6-2
人急性單核細胞細胞;THP-1己二酸二乙酯shēng huà shì jì容量:保存:-20℃5毫升
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D,E中和肉湯shēng huà shì jì容量:RT250克
CL-0453TE-10(人細胞)5×106cells/瓶×22106-4-93-錄-2-扶本胺3-Chloro-2-fluoroaniline
特點優勢:
1. 特異性:奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。