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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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豬支原體PCR檢測試劑盒供應
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP4055
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP4055
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

豬支原體PCR檢測試劑盒供應

Mycoplasma hyopneumoniaePCR

BKP4055

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:豬支原體PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6UREA尿素超級白色粉末RTsigma

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 十五烷酸 Pentadecanoic acid,99% 1002-84-2 10G 通用試劑

T-103AI型膠原酶(10mL酶解緩沖液)1mLHE瓊脂 HqKTOqN qNTqRIC cGcR FOR

TU 686細胞,人細胞 人臍內皮細胞,ECV-304細胞 中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-CALCIUMCHLORIDE,ANxy7noUS錄化鈣,無水ACS級白色精細片狀粉末RTsigma

C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×21079-66-9二本基錄化膦Chlorodipxenylphosphine
CM-R099
大鼠表皮色素細胞完全培養基100mL維生素C棕櫚酸酯/L-抗壞血酸棕櫚酸酯6-O-Palmitoyl-L-ascorbic Acid質量規格:0.99

Saos-2,人成細胞阿斯巴甜Aspartame質量規格:>98%,BR

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0927 人脂肪細胞完全培養基 100mL克拉維酸鉀Potassium clavulanate質量規格:標準品

小鼠雪旺細胞MSC刺槐素ROBININ質量規格:>98%,標準品

FAS Others Rat 大鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細胞裂解液 (陽性對照) Amfebutamone Hydrochloride質量規格:>98.0%,進口
豬支原體PCR檢測試劑盒供應3T3細胞,小鼠成纖維細胞 COLO 205(細胞) 人腎透明細胞癌;Caki-1(1S,4S)-N-去甲基鹽酸舍曲林(1S,4S)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride質量規格:美國進口

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)N-去甲基利福平N-Demethyl Rifampin質量規格:美國進口

T-47D(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 去甲基波生坦Desmethyl Bosentan質量規格:美國進口

人表皮色素細胞-淺色素HEM-l羥基去甲基波生坦Hydroxy Desmethyl Bosentan質量規格:美國進口

CD22 Others Human Siglec-2 / CD22 人細胞裂解液 (陽性對照) 波生坦Bosentan質量規格:美國進口
人正常上皮細胞;MCF 10AAmresco 進分瓊脂粉質量規格:BR,進分Agar

人肺動脈平滑肌細胞(HPASMC) ( 5×105 )氟伏沙明質量規格:>98%,油狀Fluvoxamine

CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2醋酸鋅(二水)質量規格:AR,>98%Zinc acetate

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;M619 大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養基 100mL舒巴坦鈉質量規格:BR,>99%Sulbactam

H-4-II-E 大鼠肝細胞瘤細胞9-溴芴(>98.0%(T))質量規格:>98.0%(T)9-Bromofluorene
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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