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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3947 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒供應 | Listeria monocytogenesPCR | BKP3947 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白PROTEINGELLOADINGBUFFER2X,WITHPYRONINY蛋白膠上樣緩沖液,2X 含派洛寧Y蛋白組學級橙粉紅色液體RTsigma
INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱擬桿菌BETA-BqTc-HCH 319-82-7
肺微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)亞甲基藍 Methylene blue (Dye content, ≥82%) 7220-79-3 10G 染色劑
HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 四乙酰呋核糖,英文名或英文縮寫:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,級別:,98%,規格:10毫升
人巨細胞細胞株;Mo7eL-Threonine 5g Sigma分裝
IFNA5 Others Rat 大鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替羅非班(標準品)Tirofiban HCl質量規格:HPLC>99,標準品
人成纖維細胞完全培養基 100mL普魯蘭糖;普魯蘭多糖Pullulan質量規格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
Calu-6細胞,人退行性癌細胞 克雷伯桿菌 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21維生素 E, 生育酚Vitamin E,dl-α-tocopherol質量規格:>98%,油狀
CXCL12 Protein Canine 重組狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白司他夫定Stavudine質量規格:>98,BR,可用于細胞培養
NCI-H1299(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 司他夫定(標準品)Stavudine質量規格:>98,標準品
單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒供應Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 胞1膽堿鈉;5-胞苷二1酸單鈉鹽Citicoline 質量規格:>98%,BR
小鼠細胞;L1210硬脂酸紅霉素Erythromycin stearate質量規格:USP
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1 中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL精胺Spermine質量規格:>98%,BR
U251人細胞 Human亞精胺Spermidine質量規格:>99%,進分
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞精胺1酸鹽Spermidine phosphate salt hexahydrate 質量規格:>98%(T),進口原裝
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-甲氧基shēng huà shì jì容量:RT250克
人上皮細胞cDNAHPEpiC cDNA炳1晴(劇讀) ccrylonitnilq
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 5'-三1酸鳥苷 Guanosine 5′-triphosphate (GTP... 36051-31-7 10MG 核酸衍生物
大鼠源細胞150mm培養皿shēng huà shì jì容量:2~8℃50毫克
SMMC-7721細胞,人細胞 人退行性癌細胞,Calu-6細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5Freund'sCA 10ml Sigma原裝
特點優勢:
1. 特異性:單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。