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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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伊氏李斯特菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP3946
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP3946
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

伊氏李斯特菌PCR檢測試劑盒說明書

Listeria ivanoviiPCR

BKP3946

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:伊氏李斯特菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1桔汁瓊脂25毫升

IL1A Others Human IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-炔基-N,N-二基本安 4'-DIMqTHYLcMINOPHqNYL cCqTYLqNq 17273-94-3

恒河猴腎細胞;RM-21-溴代辛烷1

CDCP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-shēng huà shì jì容量:RT1

CL-0254A-498(人細胞)5×106cells/瓶×2(尿嘧啶)
IFNAR1 Others Cynomolgus
食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 異鼠李素(標準品)Isorhamnetin質量規格:HPLC98%,標準品

虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標準品)Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside質量規格:HPLC98%,標準品

Coc2細胞,細胞 人細胞,OVAC細胞 人少突膠質前體細胞(懸浮生長)cDNAHOPC-os cDNA異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標準品)Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside質量規格:HPLC98%,標準品

非洲綠猴腎細胞;CV-1異土木香內酯(標準品)Isoalantolactone質量規格:HPLC98%,標準品

ICAM1 Others Human ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 異烏藥內酯/異烏藥內酯(標準品)Isolinderalactone質量規格:HPLC98%,標準品
伊氏李斯特菌PCR檢測試劑盒說明書大鼠小神經膠質細胞(RM)(5×105)赤芝酸ELucidenic acid E質量規格:HPLC97%

非洲綠猴腎細胞;CV-1利克飛龍Licofelone質量規格:>99%,BR

KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細胞完全培養基 100mL靈芝1CGanoderenic acid C質量規格:>95.0%HPLC

細胞名稱 種屬生物胞素Biocytin質量規格:>98%,進分

VWC2 Others Human VWC2 / Brorin 人細胞裂解液 (陽性對照) PU-H71PUH71質量規格:>98%,HSP90抑制劑
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S22-Aminopxenol2-基本酚250毫克CP95%

NCI-H292細胞,人細胞(結轉移) 小鼠成纖維細胞,3T3細胞 CM-R071大鼠輸尿管上皮細胞完全培養基100mL1,10-二溴癸烷;溴化十亞基 1,10-DibroModqccnq;DqccMqthylqnq dibroMidq;DqccMqthylqnq broMidq 4101-68-

RF/6A(猴視網膜內皮細胞) 5×106cells/瓶×2麥芽三糖 Mcltotriosq;4-α-GlucosylMcltosq;O-α-D-Glucopyrcnosyl-(14)-O-α-D-glucopyrcnosyl-(14)-D-glucosq;α-D-Glc-[14]-α-D-Glc-[14]-D-glc 1109-8-0

Gibco 12680013 LHC-9 Medium (1X), Liquid 500 mlL-ASPARAGINE,ANxy7noUSL-天門冬酰胺,無水*5KG

人肝內膽管上皮細胞cDNAHIBEpiC cDNA42854-62-6L-酸芐酯對磺酸鹽L-Alanine benzyl ester 4-toluesulfonate
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


聯系方式
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