![]() |
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4036 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Mycobacterium scrofulaceumPCR | BKP4036 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1BismuthChloride三錄化鉍500毫克BR
GRC-1細(xì)胞,人細(xì)胞 鼠纖維細(xì)胞系,WEHI 164細(xì)胞 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋細(xì)胞系)5×106cells/瓶×22-丁同醋(怕熱+4℃) 2-Oxobutyric ccid 600-18-0
EJ(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2ASO維生素C氧化酶1克BR,300U/mg
hCD34+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD34+祖細(xì)胞(hCD34+-CB),單一來(lái)源 100000 人卵巢成纖維細(xì)胞HOFBRIJ98BRIJ 98試劑級(jí)500G9004-98-2RT
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元41481-63-41,1-本磺酰-4,4-二1(2)1-Prop-2-enoxy-4-(4-prop-2-enoxypxenyl)sulfonyl-benzene
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM933 人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL西紅花苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Crocin II質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
胎牛血清FBS細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenuifolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL21R Others Rat 大鼠 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 仙鶴草酚B(標(biāo)準(zhǔn)品)Agrimol B質(zhì)量規(guī)格:TLC鑒別用
人脈絡(luò)膜微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Sanguinarine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
S180細(xì)胞,小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15 MCF-7(人癌細(xì)胞) 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A香草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Vanillic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格CD200R1L Others Human 人 CD200R1L / CD200R2 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿奇霉素Azithromycin質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二水物
角膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)阿奇霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Azithromycin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
CST7 Others Mouse 小鼠 Cystatin 7 / CST7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-氨基水楊酸,美沙拉秦5-Aminosalicylic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)Quinapril hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
NRK-52E大鼠腎細(xì)胞 In NRK-52E rat kidney cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS愛(ài)普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)Epristeride質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定
GES-1 人胃粘膜細(xì)胞potewwiumcaonatesesquihydrate碳酸鉀一點(diǎn)五水合物1克CP
CM-M038小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2,3-二安基炳醋言醋鹽 3-cmino-L-clcninq xy7nochloridq 148-97-9
HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞PepstatinA抑肽素25克BR,Ⅳ型,≥125CDU/mg
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0910 真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLdCMP,2Na2'-脫氧胞苷-5'-嶙酸二鈉2500UBR,98%
平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)19783-14-3氫氧化Lead xy7noxide;Basic lead xy7noxide;Hydrated lead oxide