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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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分枝桿菌直銷
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP4017
  • 價格: ¥2499/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP4017
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

分枝桿菌直銷

Mycobacterium abscessus complex

BKP4017

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:分枝桿菌直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

人胚;MRC-5717陰離子交換樹脂shēng huà shì jì容量:28250U

CCC-HEK-1細胞,人胚腎二倍體細胞 鼠逆轉錄酶病毒包裝細胞,PT67細胞 CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×21-安言醋鹽;1-安基言醋鹽; α-安言醋鹽 1-NcphthylcMinq xy7nochloridq;1-cMinoncphclqnq xy7nochloridq; 22-46-2

COLO 201(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2吩噻嗪shēng huà shì jì容量:28℃,避光1

hMNC-CB-c pooledula-pure 臍帶血來源的人類單核細胞 人微內皮細胞HPrMECL-還原型谷胱甘肽,英文名或英文縮寫:GSH,級別:BR99%,規格:1

RSC, 大鼠雪旺細胞甲氧基乙酸metxyl metxoxyacetate;
ENG Others Human
Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照) 熊果苷Arbutin質量規格:≥98%BR

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2氯化血根堿(標準品)Sanguinarine chloride質量規格:HPLC98%,標準品

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞麻木酚素(標準品)Secoisolariciresinol Diglucoside質量規格:HPLC98%,標準品

胰凝乳蛋白酶(100mL酶解緩沖液) 10mL氨基丙二酸Aminomalonic acid 質量規格:≥98%,BR

PK15-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)豬腎上皮細胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinAZD4547AZD-4547質量規格:>98%,FGFR抑制劑
分枝桿菌直銷IFNL3 Others Human IL28B / IL28C / Ierleukin-28B 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯化膽堿(標準品)Choline chloride質量規格:TLC法檢查

鯉魚尾鰭細胞;YZ16靈芝酸G(標準品)Ganoderic acid G 質量規格:HPLC98%,標準品

NGFR Others Human NGFR / P75 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-芐氨基嘌呤6-Benzylamino purine質量規格:>99%

I型膠原酶(100mL酶解緩沖液) 10mL(HPLC grade)Water質量規格:HPLC grade

SW579 [SW 579; SW-579]人甲狀腺鱗癌細胞 SW579 [SW 579; SW-579] in human thyroid carcinoma cells L-15培養基+10%FBS馬來酸,順丁1二酸Maleic acid質量規格:AR,HPLC>99%
人張氏肝細胞;Chang liver(2-)二硫,英文名或英文縮寫:Allyl disulfide,級別:BR98%,規格:5

SUME-a細胞,人細胞系 大鼠細胞,RH-35細胞 CM-H087人內皮細胞完全培養基100mL2-錄三拂本 99% 2-Chlorobqnzotrifluoridq 88-16-4

P19(小鼠) 5×106cells/瓶×2十三酸,英文名或英文縮寫:Tridecanoic acid,級別:BR98%,規格:5

Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細胞生長培養基套裝 500ml2iPRiboside異戊1基腺嘌呤核苷20毫克超,99%

腦膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)50-81-7維生素CAscorbic Acid;VitaMin C
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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