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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3881 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )PCR | BKP3881 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
細胞名稱 種屬二水合錄化鈣,英文名或英文縮寫:Calcium chloride dihydrate,級別:AR,99.5%,規格:250毫克
CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧化輔酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0
大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學級透明無色液體COLDsigma
人主動脈內皮細胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇,英文名或英文縮寫:2-etxyl-1-butanol,級別:高,99%,規格:25克
CL-0019AAV-293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基硫酸鋰Lithium Dodecyl Sulfate質量規格:>98%,分子生物學級
CM-R094大鼠胎兒表皮角質形成層細胞完全培養基100mL硫代甜菜堿 8Sulfobetaine 8質量規格:>98%,sigma分裝
HEC-1A, 人細胞系 肝細胞,BRL細胞 TE 115.T(人軟組織細胞)硫代甜菜堿 10Sulfobetaine 10質量規格:>98%,BR
小鼠細胞;L1210硫代甜菜堿 12Sulfobetaine 12,SDDAB質量規格:>98%,BR
EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 恩他卡朋;COMT抑制劑Entacapone質量規格:>99%,BR
脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒直銷EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅試劑Zincon質量規格:螯合劑
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-三甲硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide質量規格:>92.0%(GC)
U373細胞,人腦細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-三甲基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole質量規格:>98.0%(T)
SK-N-BE(2) (人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide質量規格:>98.0%(GC)
HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane質量規格:>97.0%(GC)
RSC, 大鼠雪旺細胞偶氮脒類引發劑V65100毫克保存:-20℃
轉化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養基 100mL2,3-務二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6
人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠血清(無菌)100克RT
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)2-脫氧鳥苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA