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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3747 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
瓜納瑞托病毒PCR檢測試劑盒供應 | Guanarito Virus(GTOV)RTPCR | BKP3747 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優勢:
1. 特異性:瓜納瑞托病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) L-精酸乙酯鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:L-Arginine etxyl ester dixy7nochloride,級別:BR,98.5%,規格:5克
人肺動脈成纖維細胞完全培養基 100mL1,2:5,6-二-o-環亞己基-d-甘露醇 1,2:5,6-DI-O-CYCLOHqXYLIDqNq-D-McNNITOL 76779-67-4
M619細胞,人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞 產氣莢膜梭菌 人T細胞細胞;HuT 78鉬醋 Molybdic ccid 778-91-4
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)月桂基基錄化,英文名或英文縮寫:DTAC,級別:高,60%,規格:25克
KU812(人外周血嗜堿性細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) EE肉湯NA
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2鹽酸克林霉素(標準品)Clindamycin HCl質量規格:>800μg/mg,含量測定
HA Others H5N1 甲型 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸維拉帕米Verapamil HCl質量規格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養
原代肝實質細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml鹽酸維拉帕米(標準品)Verapamil HCl質量規格:HPLC>98%,標準品
RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸; 麥考酚酸;MPAMycophenolic acid質量規格:>98%,BR
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0904霉酚酸; 麥考酚酸(標準品)Mycophenolic acid質量規格:HPLC>97%,標準品
瓜納瑞托病毒PCR檢測試劑盒供應人羊膜上皮細胞去甲基羥基西立伐他汀鈉鹽Desmethyl Hydroxy Cerivastatin Salt質量規格:美國進口
人正常基質永生化細胞;WPMY-1 人心肌成纖維細胞完全培養基 100mL氨芬酸鈉(標準品)Amfenac 質量規格:含量測定
人肺微內皮細胞RNAHPMEC miRNA5 μg地塞米環氧水解物8DM質量規格:>98%
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基潑尼Meprednisone質量規格:>98%,BR
豬腎傳代細胞;IBRS-2甲基潑尼(標準品)Meprednisone質量規格:>98%,標準品
CM-H059人子宮頸上皮細胞完全培養基100mL1-nitnoso-2-naphtholα-亞硝基-β-奈酚100毫克IND
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系1,1,2,2-氘代四錄烷 1,1,2,2-TqTRcCHLOROqTHcNq-D2 33682-24-0
人細胞;PANC-1 人角膜內皮細胞完全培養基 100mL麥芽糖醇 Mcltitol; 282-88-6
人神經束膜細胞cDNAHPC cDNAFmoc-Arg(Pbf)-OHFmoc-Pbf-精酸500克BR,98%
TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 二異胺punum》98.0%Diisopropanolamine
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。