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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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草魚呼腸孤病毒2型PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP3742
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-03-18
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP3742
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 草魚呼腸孤病毒2PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Grass carp reovirus(GCRV)2RTPCR
【貨號】: BKP3742
【儲存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300
ABI7500LightCycler 480iCycleriQ5CFX96SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應不超過72h-70以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u
運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板:一塊(96孔)
2
標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L100 U/L50 U/L25 U/L12.5 U/L6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
樣品稀釋液:1×20ml
4
檢測稀釋液A1×10ml
5
檢測稀釋液B1×10ml

草魚呼腸孤病毒2PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3)
簡便、快速
PCR
反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在24 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)
對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

NCI-H209(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 MRC-5(胚肺細胞)移液器P5000shēng huà shì jì容量:RT,避光100

MLF, 小鼠成纖維細胞5-錄水楊醋;5--2-羌基本加醋 5-Chlorosclicylic ccid;5-Chloro-2-xy7noxybqnzoic ccid 31-14-

USP7 Others Human USP7 / HAUSP (aa 208-560) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸丫啶shēng huà shì jì容量:28250

人胚胎胰腺組織來源細胞;CCC-HPE-2AmberliteXAD761離子交換大孔吸附樹脂1

J-1111細胞,單核細胞 人細胞,NCI-H1650細胞 CL-0436SF17(人細胞)5×106cells/瓶×2(5-1酸吡哆醛)
人細胞;PANC-1-6-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)Magenta-Gal質量規格:>98%,BR

P815細胞,肥大細胞瘤細胞 人順鉑耐藥株,SGC7901/DDP細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2檸檬酸鎂九水(>98%,BR)Magnesium  nonahydrate質量規格:>98%,BR

大鼠細胞;MMQ十二烷基硫酸鎂(分子生物學)Magnesium dodecyl sulfate質量規格:>85%,分子生物學級

RK2 Others Human RK2 / k-B / KB 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟化鎂(>98%,BR)Magnesium fluoride質量規格:>98%,BR

髓核細胞培養基NPCM-prf氫氧化鎂(>99%,BR)Magnesium hydroxide質量規格:>99%,BR
草魚呼腸孤病毒2PCR檢測試劑盒說明書人細胞;HOSDMT保護性-2'-甲氧基尿苷DMT-2'-OMe-U質量規格:>98%,BR

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] T細胞細胞,HuT78細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞,貂肺上皮細胞5-DMT-2-TBDMS-Bz-rC5-DMT-2-TBDMS-Bz-rC質量規格:>98%,BR

SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細胞系 Human5-DMT-2-TBDMS-rU5-DMT-2-TBDMS-rU質量規格:>98%,BR

LCN1 Others Human LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-DMT-2-TBDMS-iBu-rG5-DMT-2-TBDMS-iBu-rG質量規格:>98%,BR

組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)/1ml5-DMT-2-TBDMS-Ac-rC5-DMT-2-TBDMS-Ac-rC質量規格:>98%,BR
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2羧甲淀粉鈉shēng huà shì jì容量:5

CLEC6A Others Human CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸激酶 Pyruvate Kinase from rabbit muscle 9001-59-6 1KU 通用試劑

C57BL/6小鼠骨髓間質干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells衣康醋;亞基琥珀醋;2-亞基丁二醋;分解屋頭醋 Itcconic ccid;Propylqnqdiccrboxylic ccid 97-62-4

HSC1細胞,人色素瘤細胞 羅伊氏乳桿菌 B細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)35-二甲基-3-5

WPMY-1(人正常基質永生化細胞) 5×106cells/瓶×21121-60-42-;-2-; 2-; 2-醛基2-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-2-aldehyde; Picolinaldehyde; 2-Pyridyla dehyde; 2-Pyridinecarbaldehyde;

PCR檢測試劑盒:

草魚呼腸孤病毒2PCR檢測試劑盒說明書 ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min
(5)4oC 12000g
離心15min
(6)
仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min
(8)4oC 12000g
離心10minEP管底部可見白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存備用。
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA


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