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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3730
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-03-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3730
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

【產(chǎn)品名稱】: 杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Germiston VirusRTPCR
【貨號】: BKP3730

【儲存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300
ABI7500LightCycler 480iCycleriQ5CFX96SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應(yīng)不超過72h-70以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u
運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L100 U/L50 U/L25 U/L12.5 U/L6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
樣品稀釋液:1×20ml
4
檢測稀釋液A1×10ml
5
檢測稀釋液B1×10ml本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3)
簡便、快速
PCR
反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在24 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)
對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

VERO細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 人大細(xì)胞細(xì)胞,NCI-H661細(xì)胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(2-乙基己基)嶙酸酯,英文名或英文縮寫:P-204,級別:BR25-28%,規(guī)格:500

倉鼠腎細(xì)胞;HL-1本迷;大茴香迷;茴香迷;氧基本;基本基迷 cnisolq;Mqthoxybqnzqnq

GRN Others Human Granulin / GRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) READYLADDER,50BPDNAMARKERDNA MARKER生物技術(shù)級暗紫色不透明液體FROZENsigma

GC-1, 鼠精原細(xì)胞鎢酸鉀,英文名或英文縮寫:potewwium tungstate,級別:AR95%,規(guī)格:500

CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (轉(zhuǎn)鐵蛋白)
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105(1ml)雙羥萘酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pamoic acid質(zhì)量規(guī)格:含量測定

AGER Others Human AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酚酞(標(biāo)準(zhǔn)品)Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格:含量測定

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL香草醛(熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品) Vanillin質(zhì)量規(guī)格:熔點(diǎn)測定

BRL大鼠肝細(xì)胞 Rat hepatic cells BRL DMEM+10%FBS環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))3-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4,4'-雙甲氧基三苯甲基氯DMT-CL質(zhì)量規(guī)格:>97%

293FT人胚腎細(xì)胞-用于慢病毒包裝 Human embryonic kidney cell line 293FT - for leiviral packaging 人胚腎細(xì)胞N-苯甲酰-N-苯基羥胺;鉭試劑;BPHAN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon質(zhì)量規(guī)格:>98%;AR

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-氯鳥嘌呤核苷6-Chloroguanosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒說明書中國倉鼠肺細(xì)胞;V79異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isoliensinine

GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蓮心堿高氯酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine Perchlorate

細(xì)胞凍存液CFM1基苯酞(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茯苓酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pachymic acid

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Emodin
PCR檢測試劑盒

杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒說明書 ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min
(5)4oC 12000g
離心15min
(6)
仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min
(8)4oC 12000g
離心10minEP管底部可見白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA


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