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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3698 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
【產品名稱】: 口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: FootandMouth Disease Virus(FMDV)ARTPCR
【貨號】: BKP3698
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
BT-549(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養基100mL 人結直腸腺癌細胞;LoVo皮質甾酮,英文名或英文縮寫:Corticosterone,級別:CP,99%,規格:100克
EB病毒轉化的絨猴細胞;B95-8醋銻 cntimony triccqtctq 693-2-0
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) PROTEASEINHIBITORCOCKTAIL,BACTERIAL蛋白酶抑制劑混合物,細菌蛋白組學級白色粉末FROZENsigma
CL-0209SHZ-88(大鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2偏硼酸,英文名或英文縮寫: borate monohydrate,級別:BR,98%,規格:500克
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 小鼠細胞,HEPA1-6細胞 FO(細胞)AMVReverseTranscriptase 300u/1000u Promega原裝
小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFP去甲維拉帕米鹽酸鹽Norverapamil, Hydrochloride質量規格:美國進口
A10細胞,大鼠主動脈平滑肌細胞 CCL13張氏肝細胞正常,Chang liver細胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞)5×106cells/瓶×2霉酚酸內酯 (EP 雜質H)Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)質量規格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid質量規格:美國進口
RELT Others Human 人 RELT / TNFRSF19L 人細胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide質量規格:美國進口
腎動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside質量規格:美國進口
綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFP1酸三丁酯(CP)Tributyl phosphate質量規格:CP
786-O細胞,人腎透明細胞腺癌細胞 小鼠細胞,CMT93細胞 CL-0202Saos-2(人細胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(標準品)Tributyl phosphate質量規格:分析標準品
VCaP(人細胞) 5×106cells/瓶×23-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷V質量規格:HPLC≥98%,標準品
NHEM.f-c M2 正常人表皮素細胞(NHEM)少年,M2培養液中培養 500,000cells 視網膜微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-果糖-6-1酸二鈉鹽D-Fructose-6-phosphate di salt質量規格:>95%,BR
虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)白頭翁皂苷BPulchinenoside B質量規格:HPLC≥98%,標準品
口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E(±)-柚皮素(標準品)質量規格:HPLC>90%,標準品Naringenin
TMED4 Others Human 人 TMED4 / ERS25 人細胞裂解液 (陽性對照) 二乙酰鳥嘌呤質量規格:>95%N(2),9-Diacetylguanine
CL-0376LA795(小鼠)5×106cells/瓶×2山姜素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Alpinetin
Pcc4細胞,胚癌細胞 人細胞,SK細胞 Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33埃博霉素A質量規格:>98%,BREpothilone A
高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd醋酸磺胺米隆質量規格:>98%,BRMafenide Acetate
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。