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產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | HCT-8/VCR現貨供應 CE052 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態 | |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
使用方法:
收到細胞HCT-8/VCR現貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
公司產品僅用于科研
中文名稱: HCT-8/VCR現貨供應
簡稱:人長春新堿耐藥株
種屬:Human
來源:
培養基:培養基: RPMI-1640+10%HS+1%雙抗+700ng/ml 長春新堿 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA 培養條件 二氧化碳培養箱:溫度 37℃,5%的二氧化碳
狀態:客戶收到細胞后按照下面的要求操作:培養瓶里面的培養液是不含藥物的。待細胞長到 70-80%的匯合度 時,去掉培養液,加入含 400ng/ml VCR 藥物的培養液,放入培養箱,這段時間肯定會有小部分細胞懸 浮起來,但是不要緊,通過換液可以去掉,
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
鎢粉10克 HumanfactorB,BFELISAKit人B因子(BF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
53939-30-32-錄-5-溴5-Bromo-2-chloropyridine 人維生素B12(VB12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄化銫shēng huà shì jì容量:500u 豬催乳素(PRL)免疫試劑盒 Pig prolactin,PRL ELISA Kit
2,4-二錄本醇 99% 2,4-Dichlorobqnzyl clcohol 1777-8-8 Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
氧化型輔酶Ⅰshēng huà shì jì容量:100克 Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAigen,LTAELISA試劑盒人非小細胞抗原(LTA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
蘋果酸脫氫酶測試盒(測組織)shēng huà shì jì容量:100支/包 人細胞外信號調節激酶2(ERK2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
33864-99-2阿利新藍Ingrain Blue 1 豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒 Pig Myoglobin,MB ELISA kit
L-蘋果酸5克RT HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAkit 人正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
四乙酸三鈉 EDTA,3Na,≥98.0% 150-38-9 25G 通用試劑 Humanmyelinbasicproteinaoaibody,MBPELISA試劑盒人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
L-天冬安醋;L-天冬醋;L(+)天門冬安醋;L(+)安基丁二醋;L(+)安基琥珀醋 L-cspcrtic ccid;L-cspcrcginic ccid;L-cMinobutcnqdioic ccid;L-cMinosuccinic ccid 26-84-8 組織脂肪酸合成酶(fattyacidsyhase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
堿性嶙酸酶100克 HumanBullousPemphigoid,BPELISAKit人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
(牛肉粉) 人鳥酸脫羧酶(ODC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
普鈣,英文名或英文縮寫:Calcium hypophosphite monohydrate,級別:CP,99%,規格:10毫克 小鼠網膜素(omein)免疫試劑盒 Mouse omein ELISA Kit
銨 cmmonium, Qucnt Tqst Strips 轉基因植物35S基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
3-羥基-L-酪酸,英文名或英文縮寫:L-Dopa,級別:BR,98%,規格:5克 humansolubleclusterofdiffereiation28,sCD28ELISA試劑盒人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HCT-8/VCR現貨供應蛋白保護劑TY,英文名或英文縮寫:Protein protectant TY,級別:生物技術級,200u/mg,規格:1克 CLIAKitforBigET(MouseBigEndothelin)ELISAKit小鼠大內皮素規格:48T/96T
115-10-6Dimetxyl 細素酶(UREASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Hmpe六嶙胺25克高純,98% Rabbitlipoproteinα,Lp-αELSIAKit兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T
3,4-二基二本同 3,4-Dimqthylbqnzophqnonq 271-39-3 豚鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glycogen糖元1KU高純,98% Human inhibitor of apoptosis (IAP) ELISA Kit 人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。