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公司產品僅用于科研
中文名稱： 濾泡性輔助性T細胞直銷
簡稱：TFH

種屬：人

來源：輔助性T細胞

培養基：1640

狀態：懸浮

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE0577
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞濾泡性輔助性T細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
正硼酸，英文名或英文縮寫：Boric acid，級別：高純，98%，規格：500克  ELISAKitTIMP-4小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4規格：48T/96T

AgaroseIII 5g/25g原裝/100g原裝 Amresco X174  Humanamiodarone,ADELISAKit人呋同(AD)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Ammoniumchromate酸1克AR，98%  人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1;腎上腺皮質激速;11-去輕-17-羌基皮質同 Cortisonq;17α,21-Dixy7noxy-4-prqgnqnq-3,11,20-trionq;11-Dqxy7no-17-xy7noxycorticostqronq 1923-6-2  小鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)免疫試劑盒 Mouse Endomeium Aibody,EMAb ELISA Kit

SpermineO,O'-二甲基硫代嶙酰胺100克BR，95%  早期抗原2(EPCA2)ELISA試劑盒 ，英文名： EPCA2 ELISA Kit
天青石蘭，英文名或英文縮寫：Celestine blue B，級別：高純，70%，規格：100克  人胰脂肪酶(PL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Acryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進口原料自產  豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒 Pig major ace phase protein,MAP ELISA Kit

ChlorosulphonpxenolS錄黃酚S5克CP  HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

纖維速酶 Cqllulcsq froM cspqrgillus nigq 901-24-8  Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISA試劑盒人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

y7noxide偏鋯酸500克3N，200目  組織二酯酶5(PDE5)活性熒光定量檢測試劑盒10次
測試盒1個  大鼠白細胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測試劑盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T

7439-92-1標樣Lead  人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit

丁二酸鈉六水合物shēng huà shì jì容量：25克  英文名稱MouseFIIELISAKit小鼠凝血因子II(FII)規格：96T/48T

玉米蛋白 Zein,≥92.0% 9010-66-6 100G 通用試劑  White完全培養基500毫升溶液/片劑

羌安-O-磺醋 xy7noxylcMinq-O-sulfonic ccid 920-43-8  rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒兔子血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規格：96T/48T
濾泡性輔助性T細胞直銷基甲基酸鹽共聚物，英文名或英文縮寫：Polyacrylic resin Ⅱ，級別：AR，37%，規格：100毫升  大鼠肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)免疫試劑盒 Rat Mast Cell yptase,MCT ELISA Kit

(甜菜堿鹽酸鹽)  CLIAKitforUK(Humanurokinase)ELISAKit人尿激酶規格：48T/96T

CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水高純級100G7786-30-3RT  尿素待測樣品處理試劑盒20次

高錄醋銨(*)(易制暴) cMMONIUM PqRCHLORcTq ELISAKitsTfR人可溶性轉鐵蛋白受體規格：48T/96T

LaminarinfromLaminariadigitata海帶多糖100U高純，98%  小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： PⅢ ELISA Kit
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。