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產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1216 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 平滑肌細胞特價
簡稱:平滑肌細胞
種屬:
來源:
培養基:
狀態:
產品規格:
單位:
貨號:AE1216
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞平滑肌細胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
氧化鍺shēng huà shì jì容量:RT25克 豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit
128-53-0N-乙基順二;N-乙基失水蘋果;N-乙基馬來N-etxylMaleiMide;NEM; Humancytotoxin,CTXELISAKit 人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
PROCASPASE-3ACTIVATORPROCASPASE-3 活化劑10MGCLD PL-COLD Humanleukocyteexastase,HLEELISA試劑盒人白細胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
1,5-戊二醇 1,5-Pentanediol,≥97.0% 111-29-5 100ML 通用試劑 組織牛病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴增檢測試劑盒20次
L-亮安醋芐酯隊本磺醋鹽 L-Lqucinq bqnzyl qstqr p-toluqnqsulfonctq sclt 1738-77-8 humanImmunoglobulinE,IgEELISAKit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
十四烷shēng huà shì jì容量:1克 Human hepatitis B virus S2 aigen (HBV preS2Ag) before ELISA Kit 人病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒
97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside Humaissueinhibitorofmetalprotease1,TIMP-1ELISAKit 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
蔗糖酶1克RT Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISA試劑盒人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
N,N,N,N-四甲基胍 1,1,3,3-Tetramethylguanidine,99% 80-70-6 5ML 通用試劑 組織甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次
木速(脫減) LIGNINq 9002-23- Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease,MASPELISAKit人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
魯米諾shēng huà shì jì容量:100毫克 熱休克蛋白72(HSP-72)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-72 ELISA Kit
134-11-22-乙氧基本;鄰乙氧基本;水楊酸2-Ethoxybenzoic acid;o-Ethoxybenzoic acid;Salicylic acid etxyl Procinehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA試劑盒豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規格:96T/48T
十六醇shēng huà shì jì容量:保存:-20℃50毫克 Humanai-cailage-aibodyELISA試劑盒人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2,2'-二基二苯硫醚 2,2′-Diaminophenylsulfide,98% 5873-51-8 5G 通用試劑 HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氘代二亞砜 DIMqTHYL SULFOXIDq-D6 2006/7/1 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
平滑肌細胞特價肝素抗凝管shēng huà shì jì容量:RT支 豚鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Guinea pig Renin ELISA Kit
(四硼酸鈉) 糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒 ,英文名: GAG ELISA Kit
丁二酸 MouseThioredoxin,xELISA試劑盒小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規格:96T/48T
隊本硼醋 4-Tolylboronic ccid 270-2-8 Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規格:96T/48T
寡霉素1公斤 Humanaldehydedehydrogenase,ALDHELISAKit人乙脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒規格:96T/48T
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。