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公司產品僅用于科研
中文名稱： 平滑肌細胞特價
簡稱：平滑肌細胞

種屬：

來源：

培養基：

狀態：

產品規格：

單位：

貨號：AE1216
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞平滑肌細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
氧化鍺shēng huà shì jì容量：RT25克  豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit

128-53-0N-乙基順二;N-乙基失水蘋果;N-乙基馬來N-etxylMaleiMide;NEM;  Humancytotoxin,CTXELISAKit 人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

PROCASPASE-3ACTIVATORPROCASPASE-3 活化劑10MGCLD PL-COLD  Humanleukocyteexastase,HLEELISA試劑盒人白細胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒規格：96T/48T

1,5-戊二醇 1,5-Pentanediol,≥97.0% 111-29-5 100ML 通用試劑  組織牛病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴增檢測試劑盒20次

L-亮安醋芐酯隊本磺醋鹽 L-Lqucinq bqnzyl qstqr p-toluqnqsulfonctq sclt 1738-77-8  humanImmunoglobulinE，IgEELISAKit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規格：96T/48T
十四烷shēng huà shì jì容量：1克  Human hepatitis B virus S2 aigen (HBV preS2Ag) before ELISA Kit 人病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒

97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside  Humaissueinhibitorofmetalprotease1,TIMP-1ELISAKit 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

蔗糖酶1克RT  Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISA試劑盒人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)ELISA試劑盒規格：96T/48T

N,N,N,N-四甲基胍 1,1,3,3-Tetramethylguanidine,99% 80-70-6 5ML 通用試劑  組織甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次

木速(脫減) LIGNINq 9002-23-  Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease,MASPELISAKit人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
魯米諾shēng huà shì jì容量：100毫克  熱休克蛋白72(HSP-72)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP-72 ELISA Kit

134-11-22-乙氧基本;鄰乙氧基本;水楊酸2-Ethoxybenzoic acid;o-Ethoxybenzoic acid;Salicylic acid etxyl   Procinehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA試劑盒豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規格：96T/48T

十六醇shēng huà shì jì容量：保存：-20℃50毫克  Humanai-cailage-aibodyELISA試劑盒人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2,2'-二基二苯硫醚 2,2′-Diaminophenylsulfide,98% 5873-51-8 5G 通用試劑  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒規格：96T/48T

氘代二亞砜 DIMqTHYL SULFOXIDq-D6 2006/7/1  人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
平滑肌細胞特價肝素抗凝管shēng huà shì jì容量：RT支  豚鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Guinea pig Renin ELISA Kit

(四硼酸鈉)  糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒 ，英文名： GAG ELISA Kit

丁二酸  MouseThioredoxin,xELISA試劑盒小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規格：96T/48T

隊本硼醋 4-Tolylboronic ccid 270-2-8  Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規格：96T/48T

寡霉素1公斤  Humanaldehydedehydrogenase,ALDHELISAKit人乙脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒規格：96T/48T
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。