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公司產品僅用于科研
中文名稱： 小鼠細胞直銷
簡稱：NS-1

種屬：小鼠

來源：

培養基：IMDM

狀態：半貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0788
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞小鼠細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
中分子量標準蛋白，英文名或英文縮寫：Middle range protein MW marker，級別：BR，100u/mg，規格：100克  Ratbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規格：96T/48T

12650-88-3溶菌酶LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika  humancolicinELISA試劑盒人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

AZUREB天青B高純級深綠色/紫色粉末RTsigma  Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESFELISAKit人紅細胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2--5- 2-Chloro-5-fluoro,98% 84194-30-9 5G 通用試劑  牛金屬硫蛋白(MT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

銨/铔/硫銨/硫/Ammonium sulfate AR，99% 500克 國產/進口  人轉化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒 Human ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
吐溫65100克  人癌標志物-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISAKit，48T/96T人癌標志物-CA153ELISAKit，48T/96T規格：48T/96T

94-75-72,4-二錄本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid  小鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鹽培養基shēng huà shì jì容量：100克  Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA試劑盒

2-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8  Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規格：100克  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA試劑盒人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒規格：96T/48T
諾納德P40500克  細菌氧化酶定性檢測試劑盒20次

73049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone  RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

硫檸膽蔗瓊脂培養基shēng huà shì jì容量：500毫升  豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用試劑  Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒

異炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1  HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠細胞直銷甲基庚基甲酮，英文名或英文縮寫：2-Nonanone，級別：色標，99.5%，規格：1克  CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內啡肽受體規格：48T/96T

AmmoniumPersulfate 50g/100g Sigma分裝  細菌鹽肉湯500毫升

3,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR  RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規格：96T/48T

膠原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

ProteinprotectantTY蛋白保護劑TY1克生物技術級，200u/mg  Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。