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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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河弧菌(VF)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P63993
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-10-28
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P63993
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

規格

貨號

河弧菌(VF)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR)

50T

BK-P63993

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  中文名:  分子式:C25H32O15  度:93.0%

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  中文名:  分子式:C25H32O15 

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Lithocholic acid  434-13-9  中文名:石膽酸  分子式:C24H40O3 

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  2132384-01-9  中文名:  分子式:C25H32O15  度:93.0%  關鍵詞: 

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tetracycline  中文名:四環素  分子式:C22H24N2O8
上皮細胞完全培養基 100mL扁桃苷/苦杏仁苷質量規格:>98%,BRAmygdalin

U2OS-Luc teT-on細胞,熒光素酶轉染成細胞 枯草芽孢桿菌 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1扁桃苷/苦杏仁苷(標準品)質量規格:HPLC98%,標準品Amygdalin

CCL3 Protein Human 重組 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 標簽)鹽酸阿比朵爾(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Arbidol HCl

LoVo(細胞) 5×106cells/瓶×2  EDNRB / Endothelin B Receptor 細胞裂解液 (陽性對照) 阿加曲班質量規格:>99%,,細胞培養級Argatroban

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6阿加曲班(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Argatroban
成纖維細胞完全培養基 100mL鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))Phthalonitrile質量規格:>99.0%(GC)

WB-F344細胞,大鼠肝上皮樣干細胞 HL-60(原髓細胞) 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C34-丙氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Propoxyphthalonitrile質量規格:>95.0%(GC)

EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)4-戊氧基苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Pentyloxyphthalonitrile質量規格:>98.0%(GC)

ZR-75-1(癌細胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-四氟鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))Tetrafluorophthalonitrile質量規格:>98.0%(GC)

細胞;EC1091,2-萘二甲腈(>98.0%(GC))1,2-Naphthalenedicarbonitrile質量規格:>98.0%(GC)
2,4-Dihydroxypyridine  中文名:  分子式:C5H5NO2    緊張素Ⅰ   英文名稱:   Angiotensin   英文縮寫:   ANG   規格:   48T/96T

2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine  中文名:  分子式:C5H4N2O4    緊張素Ⅱ   英文名稱:   Angiotensin    英文縮寫:   ANG   規格:   48T/96T

2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名:2,4-(α,α-二甲基苯甲基)苯酚  分子式:C24H26O    緊張素1   英文名稱:   Human Angiotensin 1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   AT1

2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  中文名:  分子式:C13H16FN3O6    緊張素2受體1抗體   英文名稱:   Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody   規格:   48T/96T   英文縮寫:   AT2R1-Ab

河弧菌(VF)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)2,2'-Dithiobisbenzanilide  中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫  分子式:C26H20N2O2S2    緊張素2受體1   英文名稱:   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   AG2

聯系方式
手機:13564080845
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