日本乱人伦-日本乱人伦电影在线观看-日本乱人伦片中文三区-日本乱熟人妻精品中文字幕-日本乱熟人妻中文字幕乱码-日本乱偷人妻中文字

上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
您當(dāng)前的位置: 網(wǎng)站首頁 > 產(chǎn)品展廳 >熒光定量PCR試劑盒 >豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP7091
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-06-23
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP7091
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒

Porcine Circovirus 1 (PCV-1)

BKP7091

概述:
產(chǎn)品僅供科研使用熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會相應(yīng)的增加,這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNARNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*的定量方法,已得到全世界的公認(rèn),廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。

使用方法:
一、豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL610倍稀釋度為例)
1.
注意:產(chǎn)品僅供科研使用由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,54,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6.
換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8.
如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?/span>10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PCNC的體積也必須是200μL。
9.
用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10.
如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加23倍。
11.
產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

熒光定量PCR服務(wù):
簡介:實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的mRNA表達(dá)差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1
、熒光定量PCR服務(wù)要求:
01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
03)請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA 來源等
2
、熒光定量PCR操作程序
01)引物(探針)設(shè)計與合成。
02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結(jié)果分析。
04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料。
3
、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn):
 
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA
模板
2
.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3
10×PCR Buffer
4
2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTPdTTP2mM
5
Taq
二、操作步驟
1
.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物110pM               2μl
引物210PM              2μl
Taq
酶(2U/μl            1μl
DNA
模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72 保溫7min。
3
.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
NAMALWA
細(xì)胞,Butt's 瘤細(xì)胞 細(xì)胞,KB-C1.5細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0903200ul盒裝吸頭100U保存:-20

615小鼠瘤株;HP6155--4--3-吲哚-N-?;?/span>-β-D-安基葡糖苷(-20`C) 5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL-N-cCqTYL-BqTc-D-GLUCOScMINIDq 2609-91-6

TNFRSF10B Others Human TNFRSF10B / AILR2 / CD262 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-纈酸5RT

人胚胎,皮膚,肌肉;M-20N-羥基-5-1-2,3-25RT

CNPY4 Others Human CNPY4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (利福平)
T-106AIV
型膠原酶(10mL酶解緩沖液)1mL美康唑,英文名或英文縮寫:Miconazole nitnate,級別:19000119000,液體,6條帶,規(guī)格:1

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF 小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL知母皂苷A1 Timosaponin A1 (HPLC,94%) 68422-00-4 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品

HUVEC, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞 Human拂青務(wù)菊酯 FLUCYTHRINcTq 7014-77-2

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) NUCLEASELIMINATORWIPES去除核酸酶紙巾生物技術(shù)級25 PackRT

大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-12082-84-0癸基基溴化銨Decyltrimetxylammonium bromide
INSR Others Human
Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Long Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三十二烷(standard for GC,98.0%(GC))Dotriacontane質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,98.0%(GC)

心室肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC))1-Heptanol質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)

IgG3 Others Human IgG3-Fc / IGHG3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) γ -丁內(nèi)酯(GBL(standard for GC,99.9%(GC))4-Hydroxybutanoic acid lactone質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,99.9%(GC)

大鼠腎實質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丙位庚內(nèi)酯(Standard for GC ,>98.5%(GC))γ-Heptalactone質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)

CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CTLA4 Ig-24 China hamster ovary cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS(+)-葑酮(standard for GC, 99.5% (GC))(+)-Fenchone質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, 99.5% (GC)
豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽L-Aspartic acid di-tert-butyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474S-I-G-S-L-A-KS-I-G-S-L-A-K質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) SAMsSAMs Peptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

Dami 人成巨核細(xì)胞細(xì)胞猿猴病毒40大抗原氨基段肽段Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

MHCC-97L人細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS生長抑制素-28Somatostatin-28質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR


聯(lián)系方式
手機:13564080845
主站蜘蛛池模板: 亚洲一区二区精品 | 丝兔女郎m开腿sm调教室 | 午夜视频国产99在线看 | 亚洲av无码一区二区三区观看 | 国产精品女同 | 成人av鲁丝片一 | 国产乱人伦精品一区二区 | 四虎成人精品国产永久免费无 | 三颗国产精品视频一区二区免费 | 无码精品国产一区二区三区免费 | 国产a∨国片精品白丝jk制服 | 无码精品人妻一区二区三区爱剪 | 色偷偷中 | 丰满少妇一级毛片亚洲日韩 | 亚洲一区在线精品 | 欧美伊人久久大香线蕉 | 成人嫩草影院免费观看 | 国产v片在线播放免费观 | 91在线国产手机在线 | 麻豆精品一区入口在线观看 | 亚洲av无码专区电影在线观看 | 少妇被躁爽到高潮无码人狍大战 | 精品久久久久香蕉网 | 91成人网站在线 | 国产成人精品免费影视大全 | 欧美日韩在线在线观看 | 午夜视频国产99在线看 | 欧美人与动牲交 | 精品无码午夜一区二区三区在 | 色欲网天天无码av | 九九av免费在线观看 | 国产裸体裸美女无遮挡网站 | 中文字幕高清有码在线中字 | 国产成人精品曰本79 | 超碰人人看人人爽 | 欧美性色xxxxⅹooo | 亚洲成av人影院在线观看 | 亚洲第一网站免费视频 | 人妻丰满熟妇 | 在线国产黄片ww | 成人免费无遮挡在线播放 |